甲苯胺红不加热血清试验的原理及操作方法
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甲苯胺红不加热血清试验:简介、用途、操作步骤
一、MTT试验的简介
MTT试验是一种基于细胞色素c还原酶活性的检测方法。MTT是一种黄色的水溶性化合物,可通过细胞膜进入细胞内。在细胞内,MTT被还原成呈现紫色的甲酸甲基蓝晶体,这些晶体会在细胞内积累,从而间接反映细胞的代谢活性。
二、MTT试验的用途
MTT试验常用于细胞毒性、增殖及细胞凋亡等方面的研究。举例而言,MTT试验可以用于评估化合物、药物或其他物质对细胞的影响,进而筛选具有潜在治疗效果的药物。MTT试验也可用于检测细胞的增殖能力,从而评估细胞的生长状态。
三、MTT试验的操作步骤
MTT试验的操作步骤如下:
1、培养细胞:将待测细胞接种于96孔板中,每孔约210^4个细胞。
2、添加MTT:将MTT溶液加入每个孔中,每孔加入10L的MTT溶液(5mg/mL)。
3、孵育细胞:将含有MTT的96孔板在37℃、5%CO2的培养箱中孵育4小时。
4、去除培养液:将培养液倒掉,用洗涤液洗涤细胞三次。
5、加入DMSO:加入150L的DMSO(二甲基亚砜)。
6、振荡:用振荡器振荡10分钟。
7、检测:使用酶标仪在570nm波长下检测吸光度。
以上为MTT试验的操作步骤。需要注意的是,MTT试验涉及到多个步骤,操作过程中需严格遵守实验室安全规定,避免误操作和安全事故的发生。
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