盐析沉淀蛋白质实验报告

2024-02-18 22:20:05 来源 : 聪康网热度 : 0

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盐析法沉淀蛋白质的原理是

　　同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀。

　　盐析法沉淀蛋白质的原理是：由于向蛋白质溶液中加入了大量的盐，如硫酸铵、氯化钠等，因此使得蛋白质表面的电荷被中和，破坏了其表面的水化膜，于是达到蛋白质沉淀的效果。

　　盐析法沉淀蛋白质的原理是破坏蛋白质的水化膜。盐析法沉淀蛋白质就是将氯化钠、硫酸钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和及水化膜被破坏，导致蛋白质在水溶液中因稳定性差而沉淀。

蛋白质盐析的原理是什么

　　1、胶体的“盐析”：加盐而使胶粒的溶解度降低，形成沉底析出的过程，是胶体的聚沉现象的一种如向蛋白质溶液中加入某些浓的无机盐[如（NH4）2SO4或Na2SO4]溶液后，可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出，这种作用就叫做盐析。

　　2、原理：蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。由于水化层和双电层的存在，蛋白质溶液是一种稳定的胶体溶液。

　　3、蛋白质是高分子溶液，维持它稳定性的因素有直径、水化膜和同种电荷。大量盐加入溶液以后，会夺走蛋白质表面的水，破坏水化膜，所以蛋白质颗粒之间碰撞后就粘一起，粒径变大就沉淀了。

蛋白质的等电点测定和沉淀反应

　　1、蛋白质的等电点测定和沉淀反应如下：由于蛋白质表面离子化侧链的存在，蛋白质带净电荷。由于这些侧链都是可以滴定的，对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点。

　　2、等电点常常用于蛋白质的分离（IEF）以及蛋白质的等电点盐析。沉淀反应：蛋白质在某种理化条件下，蛋白胶体溶液的水化层或者电荷层破坏，蛋白胶体相互聚集的现象。

　　3、较高的温度和较高的离子强度通常会增加蛋白质之间的热运动和背景离子的浓度，导致蛋白质分子间的吸引力增强，进一步促使沉淀的形成。

　　4、等电点时，蛋白质的静电荷为0，也就破坏了这种双电层，导致蛋白质相互聚集在一起，从而形成大颗粒沉淀出来。

　　5、近年来蛋白质的等电点可以采用等电聚焦技术加以准确测定，但需一定的实验条件。

　　6、min），利用考马斯亮蓝法测上清液中蛋白浓度，分析所提蛋白在不同pH值条件下的溶解性。确定蛋白的等电点在pH值=4左右。

蛋白质的盐析

　　盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出，这种作用叫作盐析。盐析是物理变化，聚沉是化学变化，本质不同。

　　理化性质改变 1不对称性增加，粘稠度增加 2易同化学试剂起反应 3易被蛋白酶水解 4功能减弱或丧失 5往往会沉淀：蛋白质变性后往往会沉淀，但沉淀的蛋白质不一定变性。

　　能使蛋白质发生盐析的物质有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等，但以硫酸铵为最多。

　　一般来说都是对于富含得有蛋白质的物质进行检材。

　　盐析可以使蛋白质变性，发生凝聚，属于物理变化。就是把蛋白质颗粒吸附的带电粒子的平衡破坏了，使蛋白质凝聚析出。

　　蛋白质是分子胶体，会发生凝聚，加入电解质或加热都会使蛋白质沉淀。盐析就是加入电解质盐使蛋白质凝聚的过程。

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