蛋白质的沉淀及变性实验报告
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乙醇与蛋白质的沉淀和变性实验
1、乙醇引起的变性与沉淀 先加入蛋白液溶解,加入NaCl(盐析)降低蛋白质溶解度,形成过饱和溶液,再加入乙醇现象会更明显些。变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。
2、首先,只有高浓度乙醇长时间作用才会使蛋白质变性,低浓度的乙醇会使蛋白质的亲水结构(氢键)破坏而沉淀析出,类似于盐析。其次,变性的蛋白质是不会再溶于稀酸或稀碱了,应为变性即意味着结构的永久改变。
3、蛋白质加酒精(又叫做乙醇)会发生变性现象,出现溶解度降低、黏度增加,生物活性丧失,易被蛋白酶水解,出现白色絮状沉淀。若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,有些蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能。
蛋白质的沉淀与变性实验报告结果是什么?
蛋白质的变性:蛋白质分子中的次级键被破坏。主要是氢键和离子键。甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂可以提供自己的羟基或羰基上的氢或氧去形成氢键,从而破坏了蛋白质中原有的氢键,使蛋白质变性。
可逆沉淀反应:沉淀反应发生后,蛋白质分子内部结构并没有发生大的或者显著变化。在沉淀因素去除后,又可恢复其亲水性,这种沉淀反应就是可逆沉淀反应,也叫做不变性沉淀反应。
生物活性丧失,蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力等生物学功能。生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时蛋白质的空间结构只有轻微变化即可引起生物活性的丧失。
在沉淀过程中,蛋白质的结构和性质都没有发生显著变化,在适当的条件下,蛋白质可以重新溶解形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性沉淀。
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